General characteristics:Gram-positive, large, spore-forming rods. Spores are rarely seen as the sporulation process requires a pH around 7.5. Catalase-negative. Anaerobic, although requirements for anaerobiosis are not as strict as for many Clostridia. Non-motile

تصویر 1

تصویر 2

تصویر در فاز کنتراست

تصویر در رنگ آمیزی گرم

General characteristics: Gram-negative rods. Catalase-positive and oxidase-negative. Attacks sugars fermentatively and gas is produced. Motile. Mesophile

 تصویر 1

Phase contrast 

* افزودن ۲۵ گرم نمونه به ۲۲۵ میلی m.TSB یا m.EC(حاوی نووبیوسین) گرمخانه گذاری در ۳۷-۳۵ درجه به مدت ۲۴ ساعت

* کشت خطی بر SMAC agar و گرمخانه گذاری در ۳۷-۳۵ درجه به مدت ۲۴ ساعت که رنگ کلونی E.coli O157 بیرنگ-کرم-زرد(به علت عدم تخمیر سوربیتول) و رنگ سایر E. coli :قرمز شده

* بررسی عدم وجود آنزیم glucuronidase :

* انتقال کلونی های سوربیتول منفی به محیط کشت حاوی glucuronide مانند TBX agar ( Tryptone Bile X Glucuronide):کلونی های کرم رنگ یا محیط کشت حاوی MUG یا 4-mehtylumbelliferyl-B-D-glucuronide :کلونی های غیر فلورسنت

* انجام تستهای بیو شیمیایی و سرولوژیکی

General characteristics: Gram-negative, very slender, curved rods. Catalase-positive, but are micro-aerophilic and optimum growth is achieved in an atmosphere containing 5% oxygen and 10% carbon dioxide. Oxidase-positive. Do not attack sugars. Motile. The optimum temperature for growth for the thermophilic campylobacters is 42?C, and they do not grow at temperatures below 30C.Colonies are flat, droplet-like, glistening and tend to spread along the direction of the steak on moist agar. Older colonies become white to salmon-coloured. The colonies have a very characteristic odour

تصویر 1

تصویر 2

Phase contrast - Campylobacter coli
Phase contrast - Campylobacter jejuni
Phase contrast - Campylobacter lari
Gram stain 

۱) انتقال ۱ میلی از رقت ۰.۱ یا رقت مورد نیاز به پلیت خالی

۲) افزودن ۱۵ میلی TBX agar و پورپلیت ۱ لایه ای ( Tryptone Bile X- glucoronide)

۳) گرمخانه گذاری به مدت ۴ ساعت در دمای ۳۷-۳۰ درجه و سپس ۲۰ ساعت در دمای ۴۴ درجه

۴) شمارش کلونی های سبز-آبی

تصویری از کلنی های E.coli

General characteristics: Gram-negative cocci. Catalase- and oxidase-positive. Does not attack sugars.Small to medium-sized grey colonies

تصویر 1

تصویر 2

Phase contrast
Gram stain

باسیل گرم منفی  که تستهای اوره آز - اندول - متیل رد -KCN -آن مثبت  و تست سیترات در این باکتری منفی است .ضمن اینکه باکتری قادر به سوارمینگ  نمی باشد.

توجه شود که اعضای اوره آز مثبت خانواده آنتروباکتریاسه شامل :کلبسیلا پنومونیه -اوکسی توکا - آنتروباکتر آگلومرنس - پروتئوس و مورگانلا مورگانی می باشند.

 General characteristics: Gram-negative. Catalase- and oxidase-positive. Motile. Does not attack sugars. Obligately aerobic.Small to medium sized, grey colonies

تصویر 1

تصویر 2

Phase contrast
Gram stain

۱)۱۰ میلی از رقت ۰.۱ نمونه جامد به ۱۰ میلی LST broth با غلظت دو برابر دارای دورهام, يا ۱ میلی از نمونه مایع به ۱۰ میلی LST broth با غلظت معمولى داراى دورهام, ۴۸-۲۴ ساعت در ۳۷ درجه

۲) درصورت مشاهده گاز, ۲-۱ قطره به ۱۰میلی BG broth با غلظت معمولى ۴۸-۲۴ ساعت در بن ماری ۴۵-۴۴ درجه

۳) درصورت مشاهده گاز, ۲-۱ قطره به Tryptone water ۴۸-۲۴ ساعت در بن ماری۴۵-۴۴ درجه

۴) افزودن معرف کواکس, مشاهده حلقه قرمز رنگ در سطح

۵) کشت خطی از  BG broth حاوى گاز بر روى Mc-Conkey agar جهت ايجاد کلنی ايزوله

۶) کشت IMViC و TSI بر روى کلوني هاى مشكوك

این باکتریها بصورت باسیلهای گرم منفی ومتحرکی هستند که به خوبی در محیطهای آزمایشگاهی پرورش می یابند ودارای کپسول کوچکی می باشند وکلنیهای آن دارای پیگمان سفید - صورتی ویا قرمز بوده و معمولا در شرایط اتاق قادر به تولید پیگمان می باشند و پیگمان قرمز در سطح محیط مولر هینتون بهتر مشاهده می شود.همچنین ماده رنگی آن به نام پرودیزوزن یا پیریمین نامیده می شود.

این باکتری را می توان از عفونتهای ریوی -ادراری وخون جدا کرده و کشت آنها بوی ماهی یا ادرار می دهد.

در بین سراشیاها - مارسنس ازاهمیت بالایی برخورداربوده که این باکتری قادر به تخمیر مالتوز - مانیتول و سوکروز می باشد.سیترات مثبت واندول-اوره آز- متیل رداکتازSH2 و منفی است و بدلیل وجود پیگمان در سراشیا مارسنس مورد استفاده در تشخیص ذرات گرد و غبار هوا بوده.

 General characteristics: Gram-positive, long rods with a diameter < 0.9 µm. Catalase-positive. Attacks sugars by fermentation. Motile

Initially the colonies are small and mucoid, but quickly become medium-sized. The surface of the colonies dries out and become wrinkled. Underneath, the surface the colonies may be mucoid or dry. The colonies adhere to the agar and appear brownish or greenish, although the wrinkles are lighter in colour

تصویر 1

تصویر 2

Phase constrast

۱) تعداد باکتريها بيش از ۱۰۰ در میلی یا گرم از نمونه:

* افزودن ١ میلی از رقت ۰.۱ نمونه جامد يا ۱ میلی از نمونه مایع به پلیت خالی استریل

* افزودن ۲۰-۱۵ میلی VRB Agar يا Mc-Conkey Agar و کشت به صورت پورپليت دولايه ای

* گرمخانه گذارى در ۳۷-۳۵ به مدت ۴۸-۲۴ ساعت در خصوص لبنيات دمای ۳۰ درجه به مدت ۲۴ ساعت

* به طورهمزمان, افزودن ۱۰ میلی از رقت ۰.۱ نمونه جامد به لوله حاوی ۱۰ میلی BG broth با غلظت دو برابر دارای دورهام یا ۱ میلی از نمونه مایع به ۱۰ میلی  BG broth با غلظت معمولى داراى دورهام ۴۸-۲۴ ساعت و در ۳۷-۳۵ درجه

* درصورت مشاهده گاز در لوله BG broth شمارش کلوني هاى قرمز ارغوانی در پلیتها

* درصورت ايجاد کدورت بدون گاز کشت خطی از لوله فوق روی محيط Mc- Conkey آگاربرای بررسی کلنی موجود

* cfu/g = عكس حجم x عكس رقت x تعداد کلونى قرمز

۲) (روش MPN) تعداد باکتريها از ۱۰۰-۱ در میلی یا گرم از نمونه:

* طبق روش MPN با استفاده از محيط کشت انتخابی اوليه Tryptose Broth Lauryl Sulfate و جهت تائيد محيط کشت انتخابی BG broth می باشد

General characteristics: Gram-positive, spore-forming rods. Catalase-positive. Normally motile, although often slow. Attacks glucose by fermentation.The form of Bacillus cereus colonies varies depending on strain. Generally large colonies with a dull or frost-glass surface and undulate margin

تصویر 1

تصویر 2

Phase contrast - long chain
Phase contrast - numerous chains
Phase contrast - colony formation
Gram stain 

۱) افزودن ١ میلی از نمونه مايع به لوله حاوی ۱۰ میلی Lauryl sulfate tryptose broth با غلظت معمولی يا ۱۰ میلی از رقت ۰.۱ نمونه جامد به لوله حاوی ۱۰ میلی Lauryl sulfate tryptose broth با غلظت دو برابر

۲) گرمخانه گذارى در ۳۷-۳۵ به مدت ۴۸-۲۴ ساعت

۳) درصورت عدم مشاهده گاز در لوله پس از ۴۸ ساعت نمونه از نظر وجود کلی فرم منفی است.

۴) درصورت مشاهده گاز در لوله پس از ۴٨ ساعت انتقال ١تا ٢ قطره از محتويات لوله به ۱۰ میلی

 General characteristics: Gram-positive. Catalase-negative. Non-motile. Attacks sugars by fermentation, but the reaction is weak.Blood Agar plate which has been incubated with 5% carbondioxide for 24 hours. Small, grey-white, convex colonies

تصویر 1

تصویر 2

تصویر 3

Gram stain 

تشخیص آزمایشگاهی: اشیریشیا کولی كوكوباسيل گرم منفي  بوده که می توان از خون- مدفوع- خلط- چرک -مایع نخاع -ادرار وزخم جدا نمود کلی باسیل ، گرم منفی، بیهوازی اختیاری و بدون اسپوری بوده که درسطح آگار خوندار رشد می کند و کلنی های کروی محدب به رنگ خاکستری تولید ...

تعداد باکتريها بيش از ۱۰۰ در میلی یا گرم از نمونه:

General characteristics: Gram-negative. Catalase- and oxidase-positive. Non-motile. Attacks sugars by fermentation. Some strains produce a brown water-soluble pigment

تصویر ۱ 

Phase contrast
Gram stain 

۱) افزودن ١ گرم نمونه جامد يا ١ میلی از نمونه مایع به ۱۰ میلی آب پپتونه بافره

۲) گرمخانه گذاری در دمای ٣۵ تا ٣٧ درجه به مدت ٢٠-۱۶ ساعت

۳) افزودن۱ میلی از سوسپانسیون فوق به لوله حاوی ۱۰ میلی EE Broth (Enterobacteriacea Enrichment Broth) دارای لوله دورهام یا Brilliant Green Bile Glucose Broth) BGBG Broth) با غلظت معمولی و داراىلوله دورهام, ٢۴-۱۸ ساعت در ۳۷-۳۵ درجه

۴)پس از گرمخانه گذاری ، از لوله های فوق کشت خطی روی محيط انتخابی

۵) گرمخانه گذارى در۳۷- ٣۵ درجه به مدت ٢۴ ساعت در خصوص لبنیات دمای ۳۰ درجه در  ۲۴ ساعت

۶)کشت خطی کلنی های قرمز يا ارغوانی با هاله رسوبی قرمز روی محيط کشت نوترينت آگار گرمخانه گذارى در ۳۷-۳۵ درجه به مدت ۲۴ ساعت 

انجام آزمون های تاييدی آنتروباکترياسه برای کلنی های رشد کرده کاملا مجزا

باسيل های گرم مثبت درشت و اسپوردار بي هوازي اجباري مي باشند. اسپور دراين جنس معمولا انتهايي يا نزديك به انتها مي باشد. اغلب متحرك و داراي فلاژلا ازنوع پري تريش مي باشند. همچنین تستهاي كاتالاز و اكسيداز در آنها نیز منفي  بوده...

* انتقال ۱ میلی لیتر از رقتهای مورد نياز به پليتهای خالی استريل  

* در خصوص اغلب نمونه ها, افزودن ١۵ تا ٢٠ میلی لیتر (Plate Count Agar) 

* در مورد لبنيات, افزودن ١۵ Plate Count Skim Milk Agar ml

* کشت به روش پورپليت يک لايه ای ( چرخاندن پليت به صورت 8)

* پس از بسته شدن آگار, گذاردن پليتها به صورت وارونه در دمای ٣٠ درجه سلسيوس به مدت ٧٢ ساعت

* شمارش کلونی ها

(واحد تشکيل کلونی ) colony forming unit = cfu   نمونه,(cfu /g)

* تهيه ميانگين ازشمارش پليتهای گوناگون

General characteristics: Gram-negative. Most strains are catalase-positive. Oxidase-reaction varies. Attacks sugars by fermentation

On Blood Agar, colonies of Actinobacillus pleuropneumoniae will cluster around V factor-producing colonies. This is known as satellitism. In this case the inoculated area has been cross streaked with a strain of Acinetobacter
Actinobacillus pleuropneumoniae colonies are surrounded by a narrow beta haemolytic zone

تصویر 1

Phase contrast
Gram stain

Pneumonia in pig

چون اين كوكسي ها اكثرا در روده وجود دارند به آنها انتروكوك مي گويند .اين گروه مقاومترين استرپتوكوك درمقابل انتي بيوتيك مي باشند.

در شرايط بي هوازي بهتر رشد کرده  و درشرايط هوازي  حضور 5 تا 10 درصد گازكربونيك به رشد باكتري كمك مي نمايد برخي برروي آگار خوندار باعث ليز گلبولهاي قرمز محيط مي گردند كه به اين پديده ...

General characteristics: Gram-negative. Catalase- and oxidase-positive. Non-motile. Attacks sugars by fermentation

تصویر ۱

Phase contrast
Gram stain

General characteristics: Gram-negative. Catalase-positive and oxidase-negative. Non-motile akinetos means unable to move.Attacks sugars by oxidation or not at all. Optimum temperature for growth is 20-30°C. Part of the aerobic psychrotropic spoilage flora of raw foods .Small, grey, smooth colonies that cause no alteration of the blood. This culture has been incubated at 30°C

تصویر 1

Phase contrast - 24 hours
Phase contrast - 48 hours
Gram stain  

سه گونه بيماريزاي آن عبارتند از:

 اورئوس، اپیدرمیس و ساپروفتيكوس

خصوصيات متمايزكننده ميكروكوكوسها ازاستافيلوككها

ميكروكوكوس	استافيلوکوك	خصوصيات
+	+	رنگ آميزي گرم
-	+	تخمير گلوكز (بي هوازي)
+	+	كاتالاز
-	-	تحرك
+	-	سيتوكروم
S	R	حساسيت به باسيتراسين
R	S	حساسيت به ليزواستافين

خصوصيات باكتري شناسي:

در دماي 12 تا 24 درجه سانتیگراد رشد کرده و كلني به قطر 2 تا 4 ميليمتر برجسته صاف مدور و ...

وقتی که از پشت میکروسکوپ به یک قطره آب، یک بگ درخت و یک مشت خاک می نگری دنیای عجیب و خارق العاده میکروارگانیسم ها در مقابل دیدگانت گشوده می شود. دنیای موجودات حیرت انگیز که توانایی آنها در هیچ موجود دیگری حتی انسان به چشم نمی خورد.

به راستی چه موجودی می تواند در قدرت رشد با باکتری برابری کند؟ باکتری که شاید یک میلیونیم گرم (میکروگرم) نیز وزن نداشته باشد اما اگر شرایط محیط برای تکثیر تصاعدی آن مناسب باشد، در عرض 72 ساعت انبوه باکتریهای تولید شده وزنی سه هزار برابر وزن کره زمین خواهند داشت و این تنها یکی از جلوه های دنیای شگفت انگیز میکروارگانیسم ها است، دنیایی که در رشته میکروبیولوژی ...

A.Place a slide with a bacterial smear on a staining rack

B.STAIN the slide with crystal violet for 1-2 min

C.Pour off the stain

Note: fingers stain Gram-positive - use forceps

D.Flood slide with Gram's iodine for 1-2 min

E.Pour off the iodine

F.Decolourize by washing the slide briefly with acetone 2-3 seconds

G.Wash slide thoroughly with water to remove the acetone - do not delaywith this step

H.Flood slide with safranin counterstain for 2 min

I.Wash with water

J.Blot excess water and dry in hand over bunsen flame

بعضی از باکتریها توانایی همولایز دارند, یعنی می توانند به وسیله اگزوتوکسین گلبولهای قرمز خون را متلاشی کنند و یا به عبارتی دیگر لایز کنند.هنگامی که این باکتریها روی Blood agar کشت داده شوند یک منطقه شفاف اطراف کلونی دیدهمی شود که همان منطقه همولایز شده گلبولهای قرمز می باشد.اگر این باکتریها آنزیمی را تولید کنند که گلبولهای قرمز را کاملا لایز کند به آنها بتا همولایز میگویند.اگر این منطقه همولایز شده متمایل به سبز بود به آن آلفا همولایز می گویند.اگر باکتری درون محیط منطقه شفاف یا سبز رنگی تولید نکند به آن گاما همولایز می گویند, توجه داشته باشید که این باکتریها را گاما همولایز می نامند, نه فاقد همولایز.تولید همولایز با ویرولانس باکتری در ارتباط است.   Streptococcus pneumoniaeکه بزرگترین عامل ذات الریه باکتریایی است دارای همولایز آلفا میباشد   Strep pyogenesکه عامل گلودرد چرکین می باشد دارای بتا همولایز می باشد و  Staphyloccus aureusکه عامل toxic shock syndrome, زرد زخم, مسمومیتهای غذایی و دیگر بیماریهااست معمولا دارای بتا همولایز می باشد.

كلستريديوم پرفرنژنس ابتدا در سال 1892 توسط ولش (Welch) و نوتال (Nuttal) از جسد متلاشى شده‌ى انسانى كه در اثر قانقارياى گازدار تلف شده بود جدا شد و بررسى گرديد. آنها آنرا باسيلوس آئروژنس كپسولاتوس ناميدند كه با اصول نامگذارى باكترى‌ها به كلى مباينت داشت.

در سال 1898 ويلون (Veillon) و زوبر (Zuber) نام باسيلوس پرفرنژنس را براى آن برگزيدند. در سال 1900 ميگولا (Migula) آنرا ...